Endonucléase
Une endonucléase est une nucléase, qui coupe un acide nucléique en fragments plus courts. Les endonucléases sont capables de couper au milieu de la chaîne, par opposition aux exonucléases qui n'attaquent que les nucléotides localisés aux extrémités des fragments.
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Définitions :
- Enzyme qui clive les liaisons phosphodiesters à l'intérieur d'un brin d'ADN, formant des brins plus petits. (source : biofondations.gc)
Une endonucléase est une nucléase, qui coupe un acide nucléique en fragments plus courts. Les endonucléases sont capables de couper au milieu de la chaîne, par opposition aux exonucléases qui n'attaquent que les nucléotides localisés aux extrémités des fragments.
Certaines endonucléases dites endonucléases de restriction[1] sont des enzymes de restriction qui coupent un brin d'ADN bicaténaire en des lieux caractérisés par une séquence spécifique de nucléotides : le site de restriction. On parle de digestion de l'ADN.
Utilité
Une fois le brin d'ADN clivé, on peut se trouver dans deux cas :
- extrémité non cohésives, à bords francs, l'enzyme coupe au même lieu sur les 2 brins comme c'est cas pour Hæ III qui coupe GG/CC. Dans ce cas les brins ainsi créés ne peuvent pas se réapparier.
- extrémités cohésives, à bords collants, l'enzyme de restriction ne coupe pas au milieu de sa séquence de restriction, comme c'est le cas pour Eco RI qui reconnait la séquence G/AATTC.
A partir d'extrémité non cohésives semblables, il est envisageable d'assembler deux fragments d'ADN avec l'utilisation d'une ligase. Ceci peut servir par exemple pour insérer une séquence d'ADN dans un plasmide pour générer un vecteur d'expression.
Sources
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